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循环肿瘤细胞检测

循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)是指进入到血液循环系统中的肿瘤细胞。最新研究理论证实,除了从已形成的实体瘤病灶(原发灶、转移灶)脱落入血外,肿瘤细胞在形成实体瘤病灶之前便有可能进入血液系统中,由此提示循环肿瘤细胞的存在往往要早于影像学或临床症状的表现。逃离机体的免疫识别、机械损伤等幸存下的肿瘤细胞,会在合适的条件下发展形成转移灶。

传统组织病理学是对已形成的肿瘤组织的状态进行检测诊断,缺乏对当下即时状态的评价。且肿瘤组织异质性的存在,及单点活检仅反映局部信息的现状,使得传统组织病理学检测缺乏对原发灶、转移灶等全面整体性进行评价,另外,受限于病灶位置而存在的取样受阻,及无法反复取样等组织病理检测的局限性,使得以液体活检方式著称的循环肿瘤细胞检测技术得到重视。

CTC检测具有无创、便捷的特点。CTC代表了全面的、现在时的肿瘤生长状况和信息,更精准地反映了肿瘤发生和发展的即时信息,可实现实时的监测功能。此外,CTC检测可作为伴随诊疗方式,连续、动态地观测药物敏感性,监测耐药性的发生。因而,开展CTC检测有助于全面获取肿瘤发生发展的相关信息,更客观地指导临床治疗。

辅助诊断与参考分期
对尚未完善组织病理诊断者,CTC可联合影像学等其他手段辅助判断病灶良恶性。此外,目前TNM分期标准在肿瘤的诊治中广泛使用,是否发生远端转移是肿瘤临床分期的重要 判断依据,目前肿瘤诊断和分期主要依据影像学和病理学的检查结果,对是否存在远端转移难于做到早期发现。CTC作为有别于传统TNM分期外的独立指标,有利于发现隐匿的 早期微转移的存在,辅助参考临床分期,更精准的指导临床对肿瘤病人进行诊断与分期。
复发转移预测与监测
CTC动态反映血液中肿瘤细胞的微观变化,可早于影像学及时发现复发与转移。不仅可评估原发灶的侵袭性,还可对是否出现新增转移灶进行预测与监测,提早警示复发转移风险,指导临床诊疗,使患者获益。
疗效监测
随着肿瘤治疗方法的增多,多种治疗方法的联合应用及实体肿瘤治疗理念的革新,对治疗效果的评价提出了更高更全面的需求。传统影像学仍然是目前常用的疗效评价手段。但影像学多基于肿瘤宏观大小的变化,缺乏对肿瘤内部生物活性改变的监测,因此无法做到全面真实的疗效反映。另外,对于根治性术后接受辅助治疗的患者,影像学便不能再发挥评价疗效的作用。CTC是对血液内肿瘤细胞微观变化的反映,也是常规经血液治疗药物的直接作用靶点,不仅可反映用药的敏感性,监测耐药发生,还可反映肿瘤微观层面的生物活性,提示侵袭进展风险。在肿瘤治疗过程中,动态监测CTC数目及其变化,能够准确预测肿瘤治疗效果和进展情况。
预后评估
传统的肿瘤预后评估多基于患者的自身状况和原发灶组织病理分级,对于早期患者复发转移、晚期患者生存等预后信息难以做出早期的、全面整体性地评估。随着多种肿瘤CTC与预后相关性研究工作的开展,大量的研究数据显示CTC作为独立的预后预测因子,可有效反映患者的预后情况。
分子检测
临床治疗肿瘤的策略已经从基于患者一般状况、病理分级及肿瘤发展趋势等因素的普适性治疗,发展到基于肿瘤驱动基因指导下的个体化治疗。随着对 CTCs研究的深入,众多学者发现检测 CTC 有助于建立个体化的治疗方案。通过外周血富集分离CTC,分析CTC分子表观遗传学特征,检测CTC基因突变表型,找到药物敏感靶点与耐药位点,以期进一步指导个体化治疗。 CTC富集技术是基于抗原抗体反应原理,借助免疫磁微粒实现阴性富集CTC的方法。该方法通过逐步去除血液中的血浆、红细胞、白细胞等成分,使肿瘤细胞富集。莱尔阴性富集技术的最大亮点优势在于在高效富集CTC的基础上可最大限度地去除白细胞(去除率达99.99%以上),远高于其他阴性富集方法,提高CTC纯度。 自主知识产权imFISH技术,将基因水平的FISH技术与蛋白水平的免疫荧光染色技术相结合,建立了兼具核遗传信息及细胞形态改变的精准CTC鉴定分析方法。不受限于上皮标志物,且能排除血源性异常细胞的干扰,可实现从细胞鉴别、计数、分子分型和细胞表型分析的一步到位检测。针对不同实体瘤和不同临床应用方向,通过增加不同探针、抗体组合,可进一步提高检测灵敏性和特异性,拓展临床应用范围,满足个体化诊疗需求。